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GIBCO 16140-071熱滅活胎牛血清FBS幾大特點(diǎn)

根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集，所以很少會(huì)有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當(dāng)然，國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。

主要技術(shù)指標(biāo)
目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標(biāo)有以下幾點(diǎn)：

1、內(nèi)毒素
標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高，如Gibco 26140，只要求不高于50EU/ml，高出我國標(biāo)準(zhǔn)10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清質(zhì)量也未見影響?？梢?，內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含量*，預(yù)示著已經(jīng)污染。

2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛，數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了。

3、血紅蛋白
標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高，反之，數(shù)值越低。

4、pH
國產(chǎn)血清，大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān)，這也能用來初步鑒別血清的來源。

5、微生物
包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高，細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過0.1um過濾，大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入，又無法過濾，很難*清除，但對(duì)血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒，特別是BVDV，在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在，這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一，而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白
國產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè)，結(jié)果也很不準(zhǔn)確，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時(shí)的牛齡情況，國產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高，進(jìn)口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。

7、其它
不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清，都是不測(cè)抗生素的(無四環(huán)素胎牛血清除外)。國外，抗生素的使用很嚴(yán)格，用量也很少，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nèi)，抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象，血清中殘留很高，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利，這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。

牛血清質(zhì)量檢定指標(biāo)：

1、化學(xué)檢定：包括滲透壓（240～340）、pH（7.0～8.0）、總蛋白含量（3.5～5.0％）、血紅蛋白 （≤0.02％）
2、 微生物檢查：細(xì)菌和真菌——直接培養(yǎng)法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養(yǎng)法和DNA染色法 、牛病毒——細(xì)胞培養(yǎng)法。要求均為陰性
3、 內(nèi)毒素檢測(cè)——凝膠法和動(dòng)態(tài)濁度法 要求內(nèi)毒素含量≤10EU/ml
4、 促細(xì)胞生長測(cè)定（SP2/0-Ag14標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定）
a.zui大增殖濃度≥1.0×106個(gè)/ml、倍增時(shí)間≤20小時(shí) 克隆率＝（陽性孔平均數(shù)/培養(yǎng)孔總數(shù)）×100％
b.貼壁效率（ VERO細(xì)胞、二倍體細(xì)胞等） 10％血清――50或100個(gè)細(xì)胞/孔
貼壁效率（％）＝（每孔克隆平均數(shù)/每孔存活的培養(yǎng)細(xì)胞平均數(shù)）×100 相對(duì)貼壁效率＝被測(cè)血清貼壁效率/參考血清貼壁效